高效液相色谱法的发展,原理,特点及应用PPT
高效液相色谱法(HPLC)是一种重要的分析分离技术,其发展、原理、特点和应用如下所述。高效液相色谱法的发展高效液相色谱法的发展始于20世纪60年代末,由科...
高效液相色谱法(HPLC)是一种重要的分析分离技术,其发展、原理、特点和应用如下所述。高效液相色谱法的发展高效液相色谱法的发展始于20世纪60年代末,由科克兰(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开创了这一领域。他们开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开创了高效液相色谱的时代。这种新技术使用粒径更细的固定相填充色谱柱,提高了色谱柱的塔板数,以高压驱动流动相,使经典液相色谱需要数日乃至数月完成的分离工作得以在几个小时甚至几十分钟内完成。1971年,科克兰等人出版了《液相色谱的现代实践》一书,标志着高效液相色谱法(HPLC)正式建立。高效液相色谱法的原理高效液相色谱法的分离原理是:溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。这种分离机制与常规柱色谱相同,但填料更加精细,需高压泵推动,柱效高,分析速度快。与气相色谱不同的是,液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程,其组成、比例和pH值可灵活调节,分离模式多样。在实际操作中,主要通过改变流动相的组成来调节样品在色谱柱的保留值和选择性,从而使不同样品得到分离。高效液相色谱法的特点高效液相色谱法具有“三高一广一快”的特点:高压流动相为液体,流经色谱柱时受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压高效分离效能高,可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍高灵敏度紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级应用范围广百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势分析速度快载液流速快,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时此外,高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点。高效液相色谱法的应用高效液相色谱法在多个领域都有广泛的应用,包括但不限于:环保工程高效液相色谱分析技术可以用来检测水、空气和土壤中的重金属、有机化合物和细菌等污染物,帮助人们找到环境污染的原因和来源,进而采取相应的治理措施农业科技该技术可用于检测农产品中的农药残留、重金属含量和污染物等,分析土壤中的养分和微生物等,为农业科技发展提供数据和支持食品行业该技术可用于分析食品中的营养成分、添加剂、防腐剂、色素等物质,检测食品中的微量有害物质和重金属等,保证食品质量和安全医药研究该技术可用于检测蛋白质、核酸和药物等生物大分子,分析药品的质量和含量,探测药物中残留的有害物质等,是基础医学、临床医学和制药工业中必不可少的步骤总的来说,高效液相色谱法以其高效、快速、灵敏、应用广泛等特点,在生物医药、环保、食品、农业科技等领域发挥着重要作用,推动了相关领域的科技进步和产业发展。