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大肠菌群的测定PPT

大肠菌群是指一群能在36℃±1℃和44.5℃±0.2℃恒温器中发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性杆菌。它们通常存在于肠道内,因此被用作指示肠道污染的指标。下面是...
大肠菌群是指一群能在36℃±1℃和44.5℃±0.2℃恒温器中发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性杆菌。它们通常存在于肠道内,因此被用作指示肠道污染的指标。下面是大肠菌群测定的基本步骤: 样品处理首先,你需要将样品进行稀释。如果样品是固体或半固体,应先将其溶解在生理盐水中。然后,将样品进行10倍系列稀释,直到稀释液的浓度在10^4~10^5之间。对于液体样品,可以直接进行10倍系列稀释。 选择适当的培养基大肠菌群测定常用的培养基是结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)。选择一个适合你样品稀释度的培养基。通常情况下,你可以根据以下规则来选择:对于10^4~10^5之间的稀释度选择双层VRBA平板对于10^3~10^4之间的稀释度选择单层VRBA平板对于10^2~10^3之间的稀释度选择双倍VRBA平板对于10~10^2之间的稀释度选择麦康凯培养基或EMB培养基 接种样品用无菌棉签取一定量的样品,在单层VRBA平板上作十字划线接种,或者在双层VRBA平板的上层面作分区划线接种。接种后,将平板翻转,防止水分蒸发。 培养和结果观察将接种后的平板在36℃±1℃下培养24±2小时。在这个过程中,大肠菌群会产生气体,使培养基的颜色发生变化。观察平板上是否有菌落生长,并记录生长的菌落数。 结果计算根据生长的菌落数和样品稀释度计算大肠菌群的数量。一般情况下,以每100ml(g)样品中大肠菌群的最大可能数(MPN)来表示结果。具体计算方法可以参考国标或行业标准。注意事项实验全程应遵循无菌操作原则防止杂菌污染注意观察平板颜色的变化避免培养时间过长导致颜色变化不明显如果样品中含有其他杂菌可能会影响大肠菌群的测定结果。在这种情况下,应采用其他方法或试剂进行分离和鉴定以上是大肠菌群测定的基本步骤和注意事项。具体操作方法可能会因实验条件和样品类型的不同而有所差异。在开始实验前,应仔细阅读相关标准或规范,以确保实验的准确性和可靠性。