微生物培养基制备技术PPT
一、培养基的种类微生物培养基的种类繁多，分类方法也各不相同。二、培养基的制备原则选择适当的营养物质不同微生物对营养物质的要求不同，同种微生物在不同生长阶段...
一、培养基的种类微生物培养基的种类繁多，分类方法也各不相同。二、培养基的制备原则选择适当的营养物质不同微生物对营养物质的要求不同，同种微生物在不同生长阶段对营养物质的需求也不同营养物质浓度及比例合适营养物质浓度合适时，菌体生长良好，菌体产量高控制pH条件培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长需要控制氧化还原电位不同类型微生物对氧化还原电位的要求不同渗透压培养基中溶质微粒对水的吸引力称为渗透压防止有害物质的产生有害物质包括代谢过程中产生的有害物质和培养基制备过程中产生的有害物质三、培养基的制备流程计算根据所配培养基的配方，按比例称取各种药品称量药品称量应该准确无误，避免造成培养基中各成分比例失调溶化将称好的药品放入烧杯中，加入所需的水量，用玻璃棒不断搅拌，使药品均匀溶解调pH值培养基的pH值应用pH试纸或酸度计测定过滤液体培养基必须过滤分装培养基的分装，要根据实验要求、容器的种类和装量而定加棉塞在试管口加上棉塞，以防培养基被污染包扎将分装好的培养基试管包扎起来，准备灭菌灭菌将培养基放在灭菌锅中进行灭菌贴标签灭菌后，在试管上贴上标签，注明培养基名称、配制日期、无菌检验日期和配制者姓名四、培养基制备的注意事项配制培养基时要注意其科学性和合理性：如配制固体培养基时，琼脂用量过多，培养基过硬，不利于微生物生长；过少则培养基过软，易变形或龟裂，影响微生物的生长和菌落的形态培养基中应含有微生物生长繁殖所需要的各种营养成分如蛋白胨、牛肉膏提供氮源和碳源，氯化钠维持渗透压平衡，琼脂是培养基的凝固剂注意各种营养成分的浓度及比例在培养基的配制过程中，各营养成分的量和比例合适时，微生物才能生长良好，菌体产量才高控制培养基的pH培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长需要。培养基的pH值可用酸度计或精密pH试纸测定培养基配制完毕后必须立即灭菌：目的是防止被杂菌污染。培养基应该采用新鲜的，因为陈旧的培养基内微生物已大量繁殖，会影响微生物的分离效果注意棉塞的使用棉塞的质地要柔软疏松，不能过紧过松，塞入试管口的棉塞应露出试管口约1～2cm，并用火焰灭菌。棉塞的主要作用是阻止外界微生物进入试管内，避免污染。同时，也允许培养基中的发酵性微生物所产生的气体排出，防止爆瓶7五、常见培养基的制备1. 营养肉汤培养基成分：牛肉膏0.3g，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，水100mL，pH 7.4～7.6。制备流程：计算按照上述配方，计算所需各成分的质量称量用天平准确称量各成分溶化将称量好的成分加入烧杯中，加入适量的水，加热搅拌至完全溶解调pH值用酸度计或pH试纸调整pH值至7.4～7.6过滤将培养基通过滤纸过滤，去除杂质分装将过滤后的培养基分装到试管或锥形瓶中灭菌将分装好的培养基进行高温高压灭菌贴标签灭菌后，贴上标签，注明培养基名称、配制日期等信息2. 牛肉膏蛋白胨固体培养基成分：牛肉膏0.3g，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，琼脂1.5～2.0g，水100mL，pH 7.4～7.6。制备流程：计算按照上述配方，计算所需各成分的质量称量用天平准确称量各成分溶化将称量好的成分加入烧杯中，加入适量的水，加热搅拌至完全溶解调pH值用酸度计或pH试纸调整pH值至7.4～7.6加入琼脂将琼脂加入已溶化的营养液中，加热搅拌至完全溶解分装将溶化的培养基分装到试管或培养皿中，制成斜面或平板灭菌将分装好的培养基进行高温高压灭菌贴标签灭菌后，贴上标签，注明培养基名称、配制日期等信息六、培养基的质量控制无菌检验制备好的培养基应进行无菌检验，以确保没有污染性能检验对培养基的主要性能进行检验，如营养成分的含量、pH值、渗透压等，以确保培养基满足微生物生长的需求保质期检验对培养基的保质期进行检验，以确定其有效期和使用条件七、培养基的保存避光保存培养基应存放在避光、干燥、阴凉的地方，避免阳光直射和高温密封保存培养基应存放在密封的容器中，以防止空气中的微生物污染避免反复冻融如果培养基需要低温保存，应避免反复冻融，以免影响其质量八、培养基的灭菌高温高压灭菌将培养基放在灭菌锅中，在100～121℃、1.05kg/cm²压力下灭菌20～30分钟干热灭菌将培养基放在干燥箱中，在160～180℃温度下灭菌2～3小时过滤灭菌将培养基通过无菌滤膜过滤，去除微生物九、总结微生物培养基的制备技术是一项重要的实验技术，对于微生物的分离、培养和研究具有重要意义。在制备过程中，需要注意各种营养成分的比例和浓度、pH值的调整、灭菌和保存方法等因素，以确保培养基的质量和稳定性。同时，还需要根据不同的微生物种类和生长需求，选择适合的培养基配方和制备方法。通过合理的培养基制备技术，可以为微生物研究提供稳定、可靠的支持。
