多巴胺基树状大分子功能化反相 / 亲水相互作用 / 离子交换混合模式色谱固定相的制备与评价PPT
以下是您要求的文章,希望我能够对您有所帮助:引言多巴胺是一种内源性神经递质,在中枢神经系统中起着重要的作用。近年来,多巴胺基树状大分子(Dendrimer...
以下是您要求的文章,希望我能够对您有所帮助:引言多巴胺是一种内源性神经递质,在中枢神经系统中起着重要的作用。近年来,多巴胺基树状大分子(Dendrimers)作为药物载体备受关注。然而,对于其作为色谱固定相的应用研究较少。因此,本论文旨在制备多巴胺基树状大分子功能化反相/亲水相互作用/离子交换混合模式色谱固定相,并对其性能进行评价。材料与方法实验材料多巴胺基树状大分子(Dendrimer)硅胶丙烯酰氯氨基丙基三乙氧基硅烷十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)氢氧化钠盐酸磷酸盐缓冲液蛋白A IgG Fc受体融合蛋白兔抗人IgG(H+L)二抗人IgG1IgG2a、IgG2b标准品磷酸盐缓冲液(PBS)超纯水实验设备高效液相色谱仪(HPLC)高速离心机超声波清洗器分光光度计pH计氮吹仪多巴胺基树状大分子功能化反相/亲水相互作用/离子交换混合模式色谱柱的制备多巴胺基树状大分子的合成与功能化多巴胺基树状大分子通过多巴胺的氧化聚合反应合成,并通过丙烯酰氯和氨基丙基三乙氧基硅烷功能化CTAB的离子交换在碱性条件下,将十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与多巴胺基树状大分子溶液混合,形成离子交换层色谱柱的制备将多巴胺基树状大分子功能化硅胶加入到CTAB离子交换层中,通过高速离心和超声波清洗,制备出多巴胺基树状大分子功能化反相/亲水相互作用/离子交换混合模式色谱柱色谱性能评价静态吸附实验通过静态吸附实验,测定不同浓度的人IgG1、IgG2a、IgG2b标准品在色谱柱上的吸附容量和吸附速率常数动态吸附实验通过动态吸附实验,测定色谱柱对不同浓度的人IgG1、IgG2a、IgG2b标准品的动态吸附容量和传质速率常数洗脱性能评价通过洗脱实验,测定洗脱液的pH值和浓度对洗脱效果的影响实际样品分离将兔抗人IgG(H+L)二抗和IgG1、IgG2a、IgG2b标准品混合,通过色谱柱分离,收集各组分并测定其含量再生与循环使用性能通过再生实验,测定色谱柱的再生效果和循环使用次数稳定性评价通过长期储存实验,测定色谱柱的稳定性数据分析采用origin软件对实验数据进行处理和绘图结果与讨论结果静态吸附实验结果表明,多巴胺基树状大分子功能化反相/亲水相互作用/离子交换混合模式色谱固定相对人IgG1、IgG2a、IgG2b标准品的吸附容量和吸附速率常数均较高。动态吸附实验结果表明,该色谱固定相对人IgG1、IgG2a、IgG2b标准品的动态吸附容量和传质速率常数均较高。洗脱性能评价结果表明,在较低的pH值和浓度下,洗脱效果较好。实际样品分离结果表明,该色谱固定相能够成功分离兔抗人IgG(H+L)二抗和IgG1、IgG2a、IgG2b标准品。再生实验结果表明,经过多次再生和循环使用后,色谱柱的性能无明显下降。长期储存实验结果表明,该色谱固定相稳定性良好。讨论本研究制备的多巴胺基树状大分子功能化反相/亲水相互作用/离子交换混合模式色谱固定相具有良好的吸附性能、洗脱性能、分离效果、再生循环使用性能和稳定性。该色谱固定相有望应用于生物分子